原代細胞培養基用于人臍帶間充質(zhì)干細胞分離培養方法的研究。是培養原代細胞中供給細胞營(yíng)養和促使細胞生殖增殖的基礎物質(zhì)，也是培養原代細胞生長(cháng)和繁殖的生存環(huán)境。細胞培養基是人工模擬動(dòng)物細胞的體內生長(cháng)環(huán)境，維持體外細胞存活和增殖的營(yíng)養物質(zhì)基礎，其主要功能是為細胞提供適宜的pH和滲透壓，以及細胞本身不能合成的各種營(yíng)養物質(zhì)。
原代細胞低溫凍存是培養室常規工作和通用技術(shù)。細胞凍存在-196℃液氮中，儲存時(shí)間幾乎是無(wú)限的。細胞凍存及復蘇的原則是慢凍快融。
原代細胞培養基凍存
1、選用生長(cháng)情況好，數量較多的原代細胞，凍存前一天換液一次。
2、貼壁細胞需用0.25％胰酶常規消化將細胞消化下來(lái)，將細胞懸液收集至離心管中。
3、1000rpm離心5分鐘，棄上清液。
4、沉淀加含DMSO的培養液，計數，調整至（1-10）×106/ml。
5、將懸液分至凍存管中，每管1ml。
6、密封凍存管，封口一定要嚴，否則復蘇時(shí)易出現爆裂。
7、用記號筆標明細胞種類(lèi)，凍存日期。
8、按下列順序降溫：室溫→4℃（20分鐘〕→冰箱冷凍室（30分鐘）→超低溫冰箱（—80℃過(guò)夜）→液氮。
原代細胞培養基復蘇
1、取出細胞，迅速放入37℃溫水中快速解凍。
2、吸出細胞懸液，并加10倍以上培養液。
3、1000r/分鐘離心5分鐘，去除上清。
4、用培養液適當稀釋后接種培養瓶，放入37℃ CO2培養箱靜置培養。
鏡檢細胞貼壁能力。次日更換一次培養液，繼續培養。
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