Irvine CHANG Amnio 羊水培養基使用說(shuō)明

CHANG Amnio羊水培養基使用說(shuō)明

原代培養：原位法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒。例如，將10ml羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方0.5mL，再懸浮。在濃縮的細胞懸液中加入足夠的CHANG Amnio®，使最終鍍液體積為每個(gè)蓋片0.5mL(共4個(gè)蓋片)或每個(gè)小瓶2mL。

3.在37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養。

4. 第2天淹水培養，加入2mL CHANG Amnio®。

5. 4 - 5天后，檢查培養物的生長(cháng)情況。一旦觀(guān)察到生長(cháng)情況，應飼喂培養物。去除所有培養上清，用2mL新鮮CHANG Amnio®替換培養物。建議以后每2天喂一次培養液。

6. 在第5天或之后檢查培養物的生長(cháng)情況，當觀(guān)察到足夠的菌落時(shí)采摘。

7. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進(jìn)行培養。

原代培養：培養瓶法

1. 將羊水低速離心以濃縮細胞。

2. 用少量病人自己的羊水重懸細胞顆粒。例如，將10mL羊水紡絲上清吸至細胞顆粒上方1mL，再懸浮。加入4mL CHANG Amnio，總體積為每瓶5mL。

3.在37°C、5%-8%的CO2大氣中不受干擾地培養。

4. 第5天檢查生長(cháng)情況。用新鮮羊膜更換培養基，如果觀(guān)察到足夠的細胞生長(cháng)就收割。

5. 檢查培養物的生長(cháng)情況，此后每天更換培養基，直到觀(guān)察到足夠的菌落并準備收獲。

6. 結果是在收獲前一天用CHANG Amnio進(jìn)行培養。

傳代培養

要傳代細胞，用胰蛋白酶(或pronase，等等)處理培養物，就像你通常在傳統培養基中培養細胞那樣。但是，應該仔細監測蛋白酶的處理。在CHANG羊膜中培養的羊水細胞對蛋白酶的敏感性高于在常規培養基中培養的羊水細胞?？赡苡斜匾薷哪膮f(xié)議以考慮到這一點(diǎn)。用于培養的培養基的pH值必須在6.65-7.44之間(即培養基必須是微黃的鮭魚(yú)色)。pH值可以很容易地調整，只需將培養基放在5%-8%的CO2培養箱中，輕輕松開(kāi)蓋子約30分鐘。

注:羊膜常形成草酸鈣晶體。這些晶體的存在尚未被證明會(huì )對產(chǎn)品性能造成任何不利影響。

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上海華雅思創(chuàng )生物科技有限公司是一家為生命科學(xué)領(lǐng)域內的科學(xué)研究、細胞治療和生物制藥相關(guān)人員提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品和服務(wù)的生物高科技公司，公司主辦的干細胞搜網(wǎng)(w w w.stemcell.so)為中國干細胞領(lǐng)域大資源庫，網(wǎng)站提供：干細胞治療產(chǎn)品、細胞培養試劑耗材、臍帶MSC間充質(zhì)干細胞培養基、IPS細胞ES胚胎干細胞培養基、DC細胞淋巴細胞無(wú)血清培養基、R&D細胞因子等種類(lèi)豐富的產(chǎn)品；涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等國際公司品牌和生產(chǎn)廠(chǎng)家。以“Yes Service"核心服務(wù)理念，緊緊圍繞“Yes Service focus on Biology 越服務(wù) 專(zhuān)注生物"打造中華民族全新服務(wù)體系，我們與客戶(hù)攜手一起探索生命科學(xué)奧秘，解決人類(lèi)健康問(wèn)題，發(fā)展綠色環(huán)保生態(tài)，推動(dòng)世界和諧持續發(fā)展。