ELISA試劑盒的17個(gè)操作技巧

　　ELISA是將酶催化的放大作用與特異性抗原抗體反應結合起來(lái)的一種微量分析技術(shù)。酶標記抗原或抗體以后，既不影響抗原抗體反應的特異性，也不改變酶本身的活性。因為ELISA試劑盒價(jià)格低廉且準確性搞、反應時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，所以適合大批量的檢測，一般常常用于食品安全檢測方面。

　　ELISA試劑盒17個(gè)相關(guān)操作技巧如下:

　　1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。

　　2.合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。

　　3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

　　4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗,這樣才既能保證數據的準確性,又能反映出試劑盒的精密度。

　　5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其準確性。

　　6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

　　7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。

　　8.ELISA試劑盒實(shí)驗中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?難以清洗*。

　　9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。

　　10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。

　　11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。

　　12.手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應靜置15～30s,不要將一個(gè)酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。

　　13.對樣本的結果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測方法進(jìn)行驗證。

　　14.沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。

　　15.在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標準品溶液。

　　16.吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人ELISA試劑盒吸取的量不夠準確。

　　17.吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。