轉染試劑是一種獨特的陽(yáng)離子脂質(zhì)配方,適用細胞系種類(lèi)多,轉染效率高,而且具有很高的蛋白質(zhì)表達水平或基因沉默或活性 (RNAi)。該產(chǎn)品是出色的轉染試劑,可簡(jiǎn)單、高效、優(yōu)質(zhì)地將核酸轉入多種真核細胞內,而且適用于高通量操作。
轉染試劑由納米高分子聚合物組成,分子內含有許多氨基,在生理PH下會(huì )發(fā)生質(zhì)子化,這些質(zhì)子化的氨基可以中和DNA質(zhì)粒表面的負電荷,使DNA分子由伸展結構壓縮為體積相對較小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。轉染復合物主要是通過(guò)細胞內吞作用將DNA轉移進(jìn)入細胞,形成內含體,DNA從內含體釋放,進(jìn)入細胞質(zhì)中,再進(jìn)一步進(jìn)入核內轉錄、表達。通過(guò)納米技術(shù)生產(chǎn)出的轉染試劑在納米尺度表現出結合保護DNA能力強、毒性低的性能。
轉染試劑的應用:
將DNA導入哺乳動(dòng)物細胞和昆蟲(chóng)細胞。
同病毒協(xié)同轉染難轉哺乳動(dòng)物細胞,可顯著(zhù)增強病毒的轉染效率。
轉染試劑的使用及效果:
將2μg無(wú)內毒素質(zhì)粒DNA和4μL本產(chǎn)品分別稀釋到50μL溶液A中,將上述兩溶液混勻,加入到在1mL培養基中生長(cháng)了18-24小時(shí)、覆蓋率達到50-80%的培養細胞中,輕搖以混勻,然后在37℃/5%CO2孵箱中培養,24-72小時(shí)后根據實(shí)驗需要進(jìn)行瞬時(shí)表達分析或穩定細胞系加壓篩選。
轉染試劑主要用于哺乳動(dòng)物細胞和昆蟲(chóng)細胞的瞬時(shí)轉染以及穩定細胞系構建,可以將轉染實(shí)驗操作縮短到一分鐘即可完成。本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):
1、本產(chǎn)品和質(zhì)?;旌虾鬅o(wú)需室溫靜置孵育,直接轉染。
2、毒性低,轉染后細胞存活率高。
3、適合于多種常用的細胞系。
4、可直接加入含血清的細胞培養基中進(jìn)行轉染,而且無(wú)需在轉染后補加血清和更換超快轉染試劑盒培養基。
5、如果實(shí)驗目的在于篩選抗藥性穩定細胞系,可以在細胞傳代后可直接進(jìn)行轉染實(shí)驗,不需轉染前細胞培養時(shí)間。
6、無(wú)需在轉然后4-6小時(shí)補加血清或更換培養基。