流式細胞儀是一種用于分析細胞的技術(shù)，包括細胞計數、表型、細胞周期評估和生存能力。流式細胞儀中激光器產(chǎn)生的光被樣品中的細胞散射，由檢測器測量，然后轉化為可分析和測量的信號。 調試和校準
流式細胞儀在使用前，甚至在使用過(guò)程中都要精心進(jìn)行調試，以保證工作的可靠性和最佳性。調試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區的光路等。
激光強度：除調整反射鏡的角度以調整到所需波長(cháng)的激光出光外，還要結合顯示屏上的光譜曲線(xiàn)使激光的強度輸出為最大。
液流速度：可通過(guò)操作臺數字顯示監督，調節 氣體壓力大小以獲得穩定的液流速度。
測量區光路調節?。哼@是調試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區的液流、激光束、90散射測量光電系統垂直正交，而且交點(diǎn)較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值，因此需要在使用前或使用中對系統進(jìn)行校準或標定，這樣才能通過(guò)相對測量獲得絕對的意義。因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調整和定量標度。標準樣品應該穩定，有形成份形狀應是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學(xué)標準樣品，雞血紅細胞做為生物學(xué)標準樣品。微球用樹(shù)脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過(guò)程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血（抗凝劑：雞血=1：4），經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，最后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
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