RNA降解的常見(jiàn)原因，如何防止RNA降解

RNA降解是一個(gè)常見(jiàn)的問(wèn)題，特別是在進(jìn)行RNA提取和下游分析時(shí)。以下是導致RNA降解的一些常見(jiàn)原因及其相應的解決方案：

1. 新鮮細胞: 裂解液不足會(huì )導致裂解不充分，從而使部分RNA未被釋放出來(lái)。為了確保RNA釋放出來(lái)，應在裂解過(guò)程中加入足夠的裂解液。

2. 新鮮組織: 若組織中含有內源性核酸酶，則很難避免RNA酶的降解。建議采用的方法是在液氮條件下將組織研磨，并且，在勻漿時(shí)采用更多的裂解液。

3. 冷凍樣品: 如果樣品未經(jīng)液氮速冷直接轉移到-70℃冰箱存放，會(huì )使RNA緩慢降解。為了避免這種情況，應在樣品取材后迅速置于液氮中冷凍存放，然后轉移到-70℃冰箱存放。

4. 外源RNA酶的污染: 實(shí)驗試劑、器械等實(shí)驗用品應采用DEPC水滅菌處理，以消除外源RNA酶的污染。

5. 內源RNA酶的污染: 抑制劑失效或者用量不夠，以及實(shí)驗樣品過(guò)多或勻漿溫度過(guò)高都可能導致內源RNA酶的污染。為了減少內源RNA酶的影響，可適當增加抑制劑的濃度，確保樣品處理時(shí)處于適宜的溫度。

6. 長(cháng)時(shí)間暴露于高溫或光照環(huán)境下: RNA容易受到紫外線(xiàn)和高溫的影響而發(fā)生降解，因此在實(shí)驗過(guò)程中應避免樣品暴露于高溫或光照環(huán)境下。

7. 提取過(guò)程中的反復冷凍解凍: 這種情況會(huì )破壞RNA結構，使其更容易受到酶的作用而降解。因此，在RNA提取過(guò)程中應盡量減少冷凍解凍次數，最好一次性完成整個(gè)提取過(guò)程。

產(chǎn)品名稱(chēng)：PAXgene全血RNA管 樣本采集保存
產(chǎn)品貨號：762165
產(chǎn)品規格：2.5mL，100支/盒

PAXgene血液RNA管旨在立即穩定細胞內RNA，從而產(chǎn)生準確且可重復的基因表達數據。PAXgene血液RNA管含有一種專(zhuān)有試劑，可在采集后立即穩定細胞內RNA。細胞內RNA在室溫下穩定長(cháng)達三天或在2-8°C下穩定長(cháng)達五天。PAXgene試管可以在-20°C至-70°C的溫度下冷凍，以便長(cháng)期儲存。