BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品名稱(chēng)：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號:  554657

英文名稱(chēng)：Stain Buffer (BSA)

產(chǎn)品規格：500 mL

產(chǎn)品品牌：BD

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

BSA可用于淋巴組織、骨髓、外周血或培養細胞制備的單細胞懸液的免疫熒光染色。藥物染色緩沖液(BSA)用于熒光試劑的稀釋和應用，以及用于流式細胞術(shù)分析(或熒光顯微鏡)的細胞的懸浮液、洗滌和存儲。根據前面對染色培養基的描述，我們將藥劑染色緩沖液(BSA)配制成中性pH (pH 7.4)緩沖鹽溶液(DPBS)，其中添加了0.2% (w/v)牛血清白蛋白(BSA)蛋白。因此，藥物染色緩沖液(BSA)旨在維持細胞活力，并最大限度地提高ph敏感熒光色素(如異硫氰酸熒光素(FITC))產(chǎn)生的熒光信號強度。藥物染色緩沖液(BSA)對于用生物素化的抗體和熒光標記的親和素對細胞進(jìn)行染色是有用的，因為這種染色培養基不含生物素。當游離生物素出現在染色介質(zhì)中時(shí)，它可以干擾熒光親和素與生物素化抗體的結合，這些抗體與同源的細胞相關(guān)抗原結合。此外，游離生物素可以與細胞結合，并有助于增加暴露于熒光偶聯(lián)親和素的細胞的非特異性背景染色。藥物染色緩沖液(BSA)含有代謝抑制劑NaN3。NaN3抑制抗體交聯(lián)引起的細胞表面抗原的潛在再分配(例如，由于脫落或內化)。因此，NaN3(與維持低溫環(huán)境溫度相結合)可以防止后續流式細胞分析(或熒光顯微鏡)中免疫熒光染色細胞產(chǎn)生的熒光信號強度的潛在損失。

產(chǎn)品應用:

流式細胞術(shù)(常規檢測)、熒光顯微鏡、細胞內染色(流式細胞術(shù))(發(fā)育期間檢測)

運輸與儲存：

保存在4°C未稀釋。

推薦的實(shí)驗流程：

使用Pharmingen染色緩沖液(BSA)對細胞進(jìn)行直接免疫熒光染色的程序。

1. 使用標準方案從淋巴組織、骨髓、外周血或細胞培養中制備單細胞懸液。

2. 在冷的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中清洗細胞兩次，并通過(guò)離心將細胞制成顆粒(例如，在4°C下300 x g)。Resuspend細胞用冷Pharmingen染色緩沖液(BSA)制成顆粒，最終濃度為2 × 10e7細胞/ml。

3.將50µl等量的細胞懸液(10e6細胞)分配到試管或微孔板的圓底孔中。

4. 在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中稀釋熒光抗體至預定的最佳濃度，并添加少量的等量(例如，10µl)稀釋抗體到含有目標細胞懸液的試管或微孔。在冰上孵育20分鐘免受光。染色時(shí)間可能增加(≥45分鐘)取決于熒光抗體的熱情。

5. 用200µl(用于微孔板)或1ml(用于試管)的BSA清洗細胞兩次的抗體。每次離心后，小心地抽吸(對于微孔板或微孔管)或將細胞顆粒上清倒置并吸干(管)。

6. 將細胞顆粒重懸在200µl(用于微孔板)或0.5 ml(用于管)的Pharmingen染色緩沖液(BSA)中。轉移將細胞從微孔板上染色到適當的試管中進(jìn)行流式細胞分析(將最終體積調整到~0.5 ml)。

7. 染色后盡快(如≤4小時(shí))用流式細胞術(shù)或熒光顯微鏡分析染色后的細胞樣本。如果必須延遲分析，然后染色細胞可以用緩沖多聚甲醛固定(例如，Cytofix Buffer和4°C保存(避光)。應盡快對固定的細胞進(jìn)行分析(如染色和固定后一周)。

注1:Pharmingen染色緩沖液(BSA)同樣可以用于細胞的間接免疫熒光染色。在這種情況下，當使用未標記或生物素化一抗時(shí)，重復步驟4和步驟5。

注2:Pharmingen污點(diǎn)緩沖區(BSA)也可以用于immunofluorescent染色細胞表面抗原表達的注定要固定和immunofluorescently染色細胞因子等細胞內抗原。在流式細胞術(shù)或熒光顯微鏡分析之前，可在Pharmingen染色緩沖液(BSA)中重懸和維持細胞內細胞因子染色的細胞(例如，在4°C下，保護光線(xiàn))

產(chǎn)品訂購信息：

貨號                       名稱(chēng)                       規格

554657   BD   stain buffer 含BSA     500mL

產(chǎn)品名稱(chēng)：BD stain buffer緩沖液 含BSA 500mL裝

產(chǎn)品貨號:  554657

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BD 多色流式細胞術(shù)提供了各種目標細胞亞群的快速、多參數分析。其應用包括免疫學(xué)、免疫腫瘤學(xué)、病毒學(xué)、免疫監測等。

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