TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產(chǎn)品名稱(chēng)：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產(chǎn)品貨號：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫

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產(chǎn)品信息：

· 品牌: Takara

· 貨號: 6013

· 規格: 20 反應

pMD 19-T Vector是一種高效克隆PCR產(chǎn)物 (TA Cloning) 的專(zhuān)用載體。本載體由pUC19載體改建而成，在pUC19載體的多克隆位點(diǎn)處的Xba I 和Sal I 識別位點(diǎn)之間插入了EcoR V 識別位點(diǎn)，用EcoR V 進(jìn)行酶切反應后，再在兩側的3′端添加 “T" 而成。因大部分耐熱性DNA聚合酶進(jìn)行PCR反應時(shí)都有在PCR 產(chǎn)物的3′末端添加一個(gè) “A" 的特性，所以使用本制品可以大大提高PCR產(chǎn)物的連接、克隆效率。
由于本載體以pUC19載體為基礎構建而成，所以它具有同pUC19載體相同的功能。此外，本制品中的高效連接液Solution I 可以在短時(shí)間內 (約30分鐘) 完成連接反應，其連接液可以直接用于細菌轉化，大大方便了實(shí)驗操作。本制品中的Control Insert (500 bp) 還可以用于Control反應。
本載體與pMD 18-T Vector 相比，本制品的β-半乳糖苷酶的表達活性更高，菌落顯示藍色的時(shí)間縮短，菌落顯示的藍色更深。因此，克隆后更容易進(jìn)行克隆體的藍白篩選。

產(chǎn)品名稱(chēng)：克隆用T載體pMD™19-T Vector Cloning Kit

產(chǎn)品貨號：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫

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1. Solution I 請于冰中融解。
2. 克隆時(shí)使用的Insert DNA片段 (PCR產(chǎn)物) 建議進(jìn)行切膠回收純化，否則PCR產(chǎn)物中的短片段DNA (甚至是電泳也無(wú)法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質(zhì)都會(huì )影響TA克隆效率。
3. 按照本實(shí)驗操作進(jìn)行連接后，直接進(jìn)行轉化時(shí)的連接液不要超過(guò)20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進(jìn)行電轉化時(shí)，需對連接液進(jìn)行乙醇沉淀，純化DNA后再進(jìn)行轉化。進(jìn)行乙醇沉淀時(shí)使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進(jìn)行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環(huán)狀DNA。連接效率偏低時(shí)，可適當延長(cháng)連接反應時(shí)間至數小時(shí)。
5. 本制品來(lái)源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態(tài)細胞都可以使用，如：JM109等。

pMD 19-T Vector的結構

1. Solution I 請于冰中融解。
2. 克隆時(shí)使用的Insert DNA片段 (PCR產(chǎn)物) 建議進(jìn)行切膠回收純化，否則PCR產(chǎn)物中的短片段DNA (甚至是電泳也無(wú)法確認的非特異性小片段)、殘存引物等雜質(zhì)都會(huì )影響TA克隆效率。
3. 按照本實(shí)驗操作進(jìn)行連接后，直接進(jìn)行轉化時(shí)的連接液不要超過(guò)20 μl。當要轉化的DNA量較大或準備進(jìn)行電轉化時(shí)，需對連接液進(jìn)行乙醇沉淀，純化DNA后再進(jìn)行轉化。進(jìn)行乙醇沉淀時(shí)使用Dr. GenTLE Precipitation Carrier (Code No.: 9094) 可以提高DNA的回收率。
4. 連接反應請在25℃以下進(jìn)行，溫度升高 (>26℃) 較難形成環(huán)狀DNA。連接效率偏低時(shí)，可適當延長(cháng)連接反應時(shí)間至數小時(shí)。

5. 本制品來(lái)源于pUC19載體，因此，適合pUC19載體的感受態(tài)細胞都可以使用，如：JM109等。

產(chǎn)品名稱(chēng)：TAKARA 載體克隆試劑盒 pMD 19-T 載體

產(chǎn)品貨號：6013

產(chǎn)品品牌：takara寶日醫

買(mǎi)試劑，找華雅，更多生物試劑，就在華雅思創(chuàng )

 載體克隆試劑盒, pMD 19-T 載體, TAKARA 克隆試劑盒, PCR產(chǎn)物克隆, 分子克隆Vector Cloning Kit, pMD 19-T Vector, TAKARA Cloning Kit, PCR Product Cloning, Molecular Cloning