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教您分辨胎牛血清質(zhì)量的優(yōu)劣

更新時(shí)間:2021-11-23

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   市場(chǎng)上的胎牛血清種類(lèi)繁多,魚(yú)龍混雜,很多科研工作者,特別是剛接觸細胞培養的人,難以分辨血清質(zhì)量的優(yōu)劣。本人根據十多年來(lái)血清生產(chǎn)銷(xiāo)售的經(jīng)驗,總結如下:
  一、外觀(guān)
  拿到胎牛血清,先接觸的是血清外觀(guān),對于缺少細胞培養經(jīng)驗的人來(lái)說(shuō),外觀(guān)的判斷尤為重要
  1、顏色
  根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高于20mg/d,實(shí)際上, 血紅蛋白含量的高低對血清并無(wú)直接影響,這個(gè)指標的意義在于能體現出采血過(guò)程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的游血。國產(chǎn)血清的采血點(diǎn)很分散。大多是由屠戶(hù)采血后馬上離心收集,所以很少會(huì )有溶血,表現出明亮的蠟黃色。 當然,國產(chǎn)血清也很少有標準意義上的胎牛業(yè)消。進(jìn)口胎牛血消或多或少總有點(diǎn)浴血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂??偟膩?lái)說(shuō)。 國產(chǎn)的血清呈現出蠟黃。進(jìn)口的血清,質(zhì)量*好的呈現出談黃、微紅色,如SERANA   S-FBS-US-015. 差點(diǎn)的呈現出硫紅色或鮮紅色。當然,熱天活血清或保存不當的血清, 由于血紅蛋白的破壞氧化, 會(huì )呈現出暗紅,甚至咖啡色。
  2、沉癥
  很多血清客戶(hù), 會(huì )發(fā)現進(jìn)門(mén)血清有沉視, 從面懷疑血請的質(zhì)量問(wèn)題,這是沒(méi)有根據的。血清中的沉定是由纖維蛋白的凝鑒產(chǎn) 對面清動(dòng)量沒(méi)有任何影明。 沉浪的產(chǎn)生原因很多。 家的加工生產(chǎn)方式密切相關(guān)。國產(chǎn)的血清,大多來(lái)自北方,由于價(jià)格低廉,保存環(huán)境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產(chǎn)會(huì )經(jīng)過(guò)多次凍融,每次凍融過(guò)程,就會(huì )析出部分纖維蛋白沉淀,這樣,血清成品過(guò)濾后看起來(lái)反而更加的“干凈”,很少有沉淀產(chǎn)生。
  進(jìn)口的胎牛血清,過(guò)濾分裝前很少會(huì )反復凍融,生產(chǎn)后的成品也是清激的,但隨著(zhù)時(shí)間的推移,血清中的大量纖維蛋白會(huì )析出形成沉淀。當然,進(jìn)口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產(chǎn)后血清可能會(huì )渾獨,甚至有大量沉淀。當然,購買(mǎi)回來(lái)的血清都是冰凍狀態(tài),使用時(shí)需要融化,融化過(guò)程*好在溫度較低的狀態(tài)下慢慢進(jìn)行,否則沉淀相對較多,雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀(guān)察有一定的阻礙。
  3、澄清度
  進(jìn)口胎牛血清由于蛋白和脂類(lèi)等物質(zhì)含量低,表現為稀薄、清淡,而國產(chǎn)血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對于初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進(jìn)行對比,可容易分辨。
  胎牛血清注意事項:
  1. 血清解凍與存放:-20℃取出后建議放入2~8℃冰箱中解凍約,每隔一段時(shí)間輕輕搖晃均勻,不可直接放入溫度較高處解凍,避免因溫度改變太大,造成蛋白質(zhì)凝集而出現沉淀,血清的質(zhì)量下降。若短期無(wú)法用完一瓶,建議無(wú)菌分裝,再放回冷凍,避免反復凍融。4℃長(cháng)時(shí)間保存后血清中的變性脂蛋白及纖維蛋白,形成絮狀物質(zhì)變差。
  2. 血清是否滅活:加熱可滅活血清中補體系統,在極少數情況下(培養ES細胞,平滑肌細胞時(shí))建議滅活,在培養其余細胞時(shí)不建議滅活血清。血清滅活非常容易產(chǎn)生沉淀,如必須滅活請按56℃,30 min,輕微搖晃原則操作,滅活溫度高、時(shí)間長(cháng)、搖晃不均都容易產(chǎn)生沉淀。
  3.無(wú)血清培養基:無(wú)血清培養基在結果重復性、細胞體外分化方面有優(yōu)勢,但是,血清仍然是培養液中最基本的添加物,尤其是在原代培養或細胞生長(cháng)狀態(tài)不良時(shí),常常會(huì )先使用有血清的培養液進(jìn)行培養,待細胞生長(cháng)旺盛后再換成無(wú)血清培養液。
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