關(guān)于鱟試劑的實(shí)驗方法你了解多少？

　　因此，科學(xué)家認為血液呈淡藍色的鱟在醫學(xué)研究中有*作用。用鱟血制成試劑，再滴入注射液，若試劑立即凝固或變色，就說(shuō)明注射液內含有使人發(fā)熱、休克甚至死亡的細菌內毒素。

　　此外，鱟為國家二級保護動(dòng)物，我們呼吁政府和民間共同加強該“活化石”生物的保護。

　　鱟試劑是從棲生于海洋的節肢動(dòng)物“鱟”的藍色血液中提取變形細胞溶解物，經(jīng)低溫冷凍干燥而成的生物試劑，專(zhuān)用于細菌內毒素檢測和真菌（1,3)-β-D-葡聚糖檢測。

　　鱟試驗法是國際上檢測內毒素好的方法，它簡(jiǎn)單﹑快速﹑靈敏﹑準確，因而被歐美藥典及我國藥典定為法定內毒素檢查法，并已被世界各國所采用。能生產(chǎn)鱟試劑的主要有美國、日本、中國等國家。

　　實(shí)驗方法：

　　鱟試劑按實(shí)驗方法可分為：凝膠法、動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑。

　　凝膠法系通過(guò)鱟試劑與內毒素產(chǎn)生凝集反應的原理來(lái)定性檢測或半定量?jì)榷舅氐姆椒?。凝膠法是通過(guò)觀(guān)察有無(wú)凝膠形成作為反應的終點(diǎn)。此法操作比較簡(jiǎn)單，經(jīng)濟，不需要專(zhuān)用測定設備，可以進(jìn)行定性或半定量測定。

　　凝膠法鱟試劑常見(jiàn)規格為0.1ml/支或0.2ml/支的單個(gè)測試或0.5ml/支至5.2ml/瓶的真空封口西林瓶裝的多個(gè)測試。使用時(shí)一般應加細菌內毒素檢查用水復溶后使用。

　　特異性鱟試劑，即棄G因子鱟試劑，國內的產(chǎn)品，它專(zhuān)一對內毒素起反應，避免了G因子旁路的干擾，使檢測結果更加可靠，在藥檢和臨床檢驗方面是*的理想檢測試劑。

　　動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑、終點(diǎn)濁度法鱟試劑、動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑、終點(diǎn)顯色法鱟試劑，這四種方法都是定量檢測內毒素的。這幾種定量法鱟試劑統稱(chēng)光度法鱟試劑。

　　根據檢測原理，終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測鱟試劑與內毒素反應過(guò)程中的濁度變化而測定內毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見(jiàn)商品化產(chǎn)品。動(dòng)態(tài)濁度法（又稱(chēng)動(dòng)態(tài)比濁法）是檢測反應混合物的濁度上升某一預先設定的吸光度所需要的反應時(shí)間，或是檢測濁度增加速度的方法。

　　動(dòng)態(tài)濁度法的特點(diǎn)為：1. 能準確定量。2.檢測范圍寬，可達4個(gè)數量級。3.靈敏度高達0.005EU/ml。4. 操作簡(jiǎn)便，系統自動(dòng)檢測分析，一步即成。5. 經(jīng)濟實(shí)用，試劑樣品需要量少，可降至50μL。6. 和微生物檢測系統Elx808（配套IU）及專(zhuān)用軟件TALgent使用，一次可同時(shí)檢測多達96個(gè)樣品。

　　終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內毒素反應過(guò)程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團的多少而測定內毒素含量的方法，根據產(chǎn)物顏色判斷內毒素濃度，又稱(chēng)為比色法。顯色基質(zhì)法由于不依賴(lài)凝固蛋白形成凝膠，抗干擾能力強，特別適用于生物制品（蛋白、疫苗等）和臨床樣品（黃疸、血液、尿液）的細菌內毒素檢測。

　　終點(diǎn)顯色法是反應時(shí)間最短的鱟試驗法，只需要16分鐘就能得出結果。而且可以偶氮化染色劑，避開(kāi)某些有色檢品自身顏色對鱟試驗的干擾。終點(diǎn)顯色法不需要特殊的檢測儀器就能準確定量。

　　動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑兼有動(dòng)態(tài)濁度法和終點(diǎn)顯色法鱟試劑的優(yōu)點(diǎn)，抗干擾能力強，使用簡(jiǎn)單方便，檢測范圍寬，靈敏度高達0.005EU/ml, 是世界上好的鱟試劑。但是價(jià)格較高。

　　如果您僅需要檢測樣品的內毒素*，可以選擇凝膠法鱟試劑，通過(guò)確定內毒素限值及最大有效稀釋倍數，做樣品的干擾試驗從而確定使用的鱟試劑的靈敏度。如果您需要定量測定樣品中內毒素含量則應選擇顯色基質(zhì)鱟試劑盒或動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。日常檢測量不大時(shí)，可以選擇終點(diǎn)顯色法鱟試劑，用普通的分光光度計就可完成實(shí)驗。如果您檢測的樣品是生物制品、疫苗、血液制品等最好選用終點(diǎn)顯色法鱟試劑或動(dòng)態(tài)顯色法鱟試劑。如果您日常的檢測量比較大，檢測的樣品對鱟試劑的干擾不大，可選用動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑。動(dòng)態(tài)濁度法鱟試劑特別適用于制藥企業(yè)對產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中的內毒素水平的監控。動(dòng)態(tài)濁度法與動(dòng)態(tài)顯色法需要帶溫育系統的動(dòng)態(tài)光度測定儀器及配套軟件。微生物檢測系統El808（配套IU）適用于所有的定量法鱟試驗。