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關(guān)于TFF濃縮EV的相關(guān)原理

更新時(shí)間:2022-02-14

閱讀:1407

什么是EV?
細胞外囊泡(ev)是細胞分泌的納米顆粒,主要參與細胞間通訊過(guò)程。在過(guò)去的幾年里,EV獲得了越來(lái)越多的興趣從科學(xué)界,成為一個(gè)多學(xué)科的研究領(lǐng)域。EV具有由于納米尺寸和生物活性含量所產(chǎn)生的*的物理化學(xué)性質(zhì)。EV能夠跨越多種生物屏障,比如細胞膜和血腦屏障,它們參與了許多病理過(guò)程?;谶@些原因,EV前景廣闊,應用于藥物靶點(diǎn)、生物標志物和給藥載體。


傳統EV濃縮方法

將EV用于科學(xué)和醫療應用的一個(gè)主要挑戰是隔離過(guò)程,因為EV可以在各種復雜的生物基質(zhì)中找到,這些基質(zhì)是由大量的在尺寸和密度上重疊的納米生物材料。

常用的隔離技術(shù)ev與其他流體組分的分離是超離心法(UC),即密度梯度(DG),阻垢層析(SEC)。然而,這些方法可能是有限的輸入量、時(shí)間消耗和EV產(chǎn)量。例如UC協(xié)議能夠處理體積較大(可達1.5 L),但回收率較低[15,16],且耗時(shí)較長(cháng)離心步驟,經(jīng)常破壞EV,并引起共沉淀污染物。雖然DG和SEC通常會(huì )產(chǎn)生純度高的EV配方,這些方法耗費時(shí)間,導致低收益,并且需要較小的體積(小于5毫升)。此外,上述方法的臨床實(shí)際操作具有挑戰性臨床級生產(chǎn)的無(wú)菌和放大要求。因此,改進(jìn)技術(shù)能夠以可擴展、可再生和無(wú)菌的方式濃縮EV,這對未來(lái)是必要的臨床要求。

在過(guò)去的幾年里,用于純化合成納米粒子、蛋白質(zhì)、液體懸浮液中的病毒也被用于EV分離。這些新興EV的分離方法主要是利用抗原-抗體結合親和力、高性能液體色譜法或過(guò)濾。例如,場(chǎng)流分餾(FFF)]和非對稱(chēng)流場(chǎng)流分餾(AF4)依賴(lài)于作用于流經(jīng)的液體懸浮液的場(chǎng)管式過(guò)濾器。切向流過(guò)濾是另一種新興的耦合滲透技術(shù)膜過(guò)濾和流動(dòng),以從膠體基質(zhì)中獲得有效濃度的ev。


全新TFF技術(shù)

切向流動(dòng)過(guò)濾(TFF)不同于傳統的終端過(guò)濾,因為流體是切向流動(dòng)的以避免濾餅的形成。事實(shí)上,通過(guò)終端過(guò)濾,較大的顆粒通常會(huì )堵塞膜孔,導致顆粒分離受損這是基于原始孔隙大小。TFF被評價(jià)為一種基于大小的EV濃度方法,能夠處理可伸縮量的生物液體。UC和TFF的并行比較處理大量的條件細胞培養基進(jìn)行。最后,TFF的能力為了處理從病人抽脂液中提取的液體進(jìn)行了評估。在各種臨床相關(guān)的生物基質(zhì),脂肪組織尤其相關(guān)。脂肪組織調節多種代謝過(guò)程和是一個(gè)來(lái)源間充質(zhì)干細胞分泌廣泛的選擇可溶性因子和具有再生特性的EV。


產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱(chēng):HansaBioMed TFF-Easy EV中空纖維過(guò)濾器

產(chǎn)品貨號:TFF-Easy

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